การตรวจระดับโมเลกุลของยีนที่สร้าง Asparaginyl endopeptidase ในพยาธิตัวกลมชนิด Angiostrongyluscantonensis ด้วยเทคนิค semi-nested PCR

A semi-nested pcr assay for molecular detection of Asparaginyl Endopeptidase Gene in Angiostrongyluscantonensis

Name: นันท์นภัส สุขเกษม

Organization : มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ. คณะวิทยาศาสตร์

Name: ฐาปนา ชลธนานารถ

Organization : มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ. คณะวิทยาศาสตร์

Name: ธนวรรณ เตชางกูร

Organization : มหาวิทยาลัยศรีนครินทรวิโรฒ. คณะวิทยาศาสตร์

Email : Thanawant@g.swu.ac.th

keyword: โรคพยาธิหอยโข่ง

; โรคเยื่อหุ้มสมองอักเสบ

ThaSH: สมอง -- โรค

ThaSH: พยาธิวิทยา

ThaSH: ระบาดวิทยาเชิงโมเลกุล

Abstract: พยาธิตัวกลมชนิด Angiostrongyluscantonensis เป็นปรสิตที่ก่อโรคพยาธิหอยโข่ง (angiostrongyliasis) หรือโรคเยื่อหุ้มสมองอักเสบชนิดอีโอซิโนฟิลิก (eosinophilic meningitis) ซึ่งก่อให้เกิดอาการทางคลินิกที่รุนแรงถึงขั้นเสียชีวิต พยาธิตัวกลมชนิดนี้พบรายงานการระบาดในหลายพื้นที่ทั่วโลก รวมทั้งในประเทศไทยซึ่งมีรายงานการระบาดอย่างต่อเนื่อง การวินิจฉัยโดยทั่วไปมักใช้การตรวจทางภูมิคุ้มกันวิทยา อย่างไรก็ตามในปัจจุบันมีการพัฒนาการตรวจระดับโมเลกุลที่สามารถตรวจสอบได้อย่างถูกต้องแม่นยำ คือ การตรวจโดยใช้เทคนิคการเพิ่มปริมาณสารพันธุกรรมด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) ผู้วิจัยได้พัฒนาวิธี seminested PCR เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการตรวจสอบให้มีความแม่นยำมากขึ้น โดยออกแบบไพรเมอร์ที่จำเพาะต่อยีน Ac-AEP ซึ่งเมื่อแปลรหัสพันธุกรรมออกมาแล้วจะได้เอนไซม์ asparaginyl endopeptidase ผลที่ได้จาก PCR ด้วยไพรเมอร์คู่นอกได้ชิ้นดีเอนเอขนาดประมาณ 1,400 คู่เบส จากนั้นนำผลิตภัณฑ์จาก PCR ในรอบแรกไปทำ PCR รอบที่ 2 ด้วยไพรเมอร์ด้านในได้ผลผลิต PCR ขนาดประมาณ 500 คู่เบส วิธีการนี้จึงสามารถนำไปใช้ในการจำแนก A. cantonensis ออกจากหนอนพยาธิชนิดอื่นได้

Abstract: Angiostrongyluscantonensis is a parasite causes angiostrongyliasis or eosinophilic meningitis, whichresults in severe clinical symptoms leading to death.The incidence has been reported in many areas around the world. In Thailand, eosinophilic meningitis has been continuously reported.Immunological screening is a basic technique usually used for detection.Recently, a molecular technique, polymerase chain reaction (PCR), has been applied for accurately detection of the parasitic infection. We developed the semi-nested PCR for the detection of A. cantonensis using specific primers for the Ac-AEP gene encoded the asparaginyl endopeptidase enzyme. Approximately 1,400 bp fragments were obtained from the outer primers, and were used for the semi-nested PCR. The second primers were successfully amplified the 500 bp PCR product. This method could be a potential tool for both detection and discrimination of A. cantonensis.

มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าพระนครเหนือ. สำนักหอสมุดกลาง

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: library@kmutnb.ac.th

Created: 2560

Modified: 2019-07-03

Issued: 2562-07-03

บทความ/Article

application/pdf

BibliograpyCitation : ใน มหาวิทยาลัยสยาม คณะวิทยาศาสตร์. การประชุมวิชาการวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีระหว่างสถาบัน ครั้งที่ 5 (ASTC 2017) (pp.284-290). กรุงเทพฯ : มหาวิทยาลัยสยาม

tha

©copyrights มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าพระนครเหนือ

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	ASTC 2017pp.284-290.pdf	826.71 KB	6	2021-04-12 21:33:11

ใช้เวลา

0.022008 วินาที