การศึกษาบริเวณเร่งปฏิกิริยาที่ตำแหน่ง S1-subsite ของเอนไซม์ปาเปนบริสุทธิ์ด้วยสับสเตรทสังเคราะห์ที่เป็นอนุพันธ์ของพารา-ไนโตรอะนิไลด์

Study on active site at S1-subsite position of purified papain with synthesized p-nitroanilide derivative substrates

Name: ศิริพร จิรเจริญผล

Organization : มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

Name: Siriporn Jirajarounpol

keyword: pure papain1 Sl subsitel synthesizedp-nitroanilide derivative substrates

Abstract: The aim of the work presented in this thesis was to study active site at S,-subsite position of purifiedpapain with synthesizedp-nitroanilide derivative substrates. Papain was extracted from the latex ofthe unripe papaya fruits (Carica papaya L.). It was mixed with saturation 2,2'-dypyridyl disulphide(2PDS) immediately for antiautolysis. Papain was purified by the fast protein liquidchromatography (FPLC) with a Hiload 26/10 SP-Sepharose HP column and showed only oneband on SDS-PAGE, with a low molecular mass of purified papain was estimated at 29 kilo-daltons.The p-nitroanilide derivative substrate, N-Ac-L-Phe-Gly-pNA, N-Ac-L-Phe-Leu-pNA,N-Ac-L-Phe-Arg-pNA, N-Ac-L-Phe-Phe-pNA and N-Ac-L-Phe-Glu-pNA were synthesized in ourlaboratory and proved to be pure forms by thin-layer chromatography, optical rotation,nuclear magnetic resonance, mass spectroscopy and elemental analysis. The kinetic study showedthat the kc,JKm of purified papain toward N-Ac-L-Phe-Gly-pNA, N-Ac-L-Phe-Leu-pNA,N-Ac-L-Arg-Phe-pNA and N-Ac-L-Phe-Phe-pNA were 269.77, 1367.00, 1469.37 and473.49 Mกำลัง-1'.sde]y'-1, respectively, except N-Ac-L-Phe-Glu-pNA whereas papain activity toward saturatedNAc-L-Phe-Glu-pNA at 0.05 dA,,drnin. The result reveals the broad specificity of S1-subsitepocket located inside the active site of papain.

มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

Address: กรุงเทพมหานคร (Bangkok)

Email: info.lib@mail.kmutt.ac.th

Name: รศ.ดร. กนก รัตนะกนกชัย

Role: อาจารย์ที่ปรึกษา

Created: 2545

Issued: 2005-09-20

Modified: 2006-05-10

วิทยานิพนธ์/Thesis

ISBN: 9749551362

CallNumber: BCT51

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: เทคโนโลยีชีวเคมี

Grantor: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

©copyrights มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	BCT51.pdf	7.22 MB	55	2024-07-25 15:34:43
2	BCT51ab.pdf	91.54 KB	20	2018-05-13 03:54:32
3	BCT51ab.txt	1.65 KB	6	2018-05-13 03:54:33

ใช้เวลา

0.050499 วินาที