Agrobacterium-mediated Transformation of Mungbean[Vigna radiata (L.) Wilczek.

การใช้อะโกรแบคทีเรียเพื่อการถ่ายยีนเข้าสู่ถั่วเขียว [Vigna radiata (L.) Wilczek]

Name: พจมาลย์ สุรนิลพงศ์

Organization : สำนักวิชาเทคโนโลยีการเกษตร มหาวิทยาลัยวลัยลักษณ์

Name: สนธิชัย จันทร์เปรม

Organization : ภาควิชาพืชไร่นา คณะเกษตร มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ วิทยาเขตกำแพงแสน

Name: Hyeon-JE CHO

Organization : Maxygen Inc, USA.

Name: Widholm, Jack M

Organization : Department of Crop Sciences, University of Illinois, USA.

Name: อารีย์ วรันยุวัฒน์

Organization : สาขาวิชาเทคโนโลยีการผลิตพืช สำนักวิชาเทคโนโลยีการเกษตร มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีสุรนารี

keyword: แบคทีเรีย

; ยีน

ThaSH: ถั่วเขียว

; Agrobacterium rhizogenes

; Agrobacterium tumefaciens

; Insect control protein

; Hairy root

; Mungbean transformation

; Cholesterol oxidase (choA) gene

Abstract: พลาสมิด pCAMBIA 1301-choA ได้ถูกถ่ายเข้าไปใน Agrobacterium rhizogenes สายพันธุ์ K599 และ A. tumefaciens สายพันธุ์ EHA105 เพื่อใช้ในการถ่ายยีนเข้าสู่ถั่วเขียว ใบเลี้ยงถั่วเขียวจากต้นกล้าอายุต่างๆ ถูกนำมาใช้เลี้ยงร่วมกับเชื้อทั้งสองสายพันธุ์ พบว่าใบเลี้ยงอายุ 2 วัน ที่เลี้ยงร่วมกับเชื้อสายพันธุ์ที่ชักนำให้เกิดรากแสดงความสามารถในการสร้างรากฝอยจำนวนมากกว่าใบเลี้ยงอายุอื่น ๆ โดยเฉลี่ยเกิดรากฝอย 10 ราก ทั้งบริเวณรอยกรีดด้านบน และรอยตัดที่ไฮโปคอลติล โดยรากฝอย 10 ราก จาก 75 ราก (13.25 เปอร์เซ็นต์) แสดงกิจกรรมของยีนgus ส่วนใบเลี้ยงที่ตัดและเลี้ยงบนอาหาร MB ที่เติม BAP เข้มข้น 2 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร เป็นเวลา 4 วัน ก่อนนำไปเลี้ยงร่วมกับเชื้อ A. tumefaciens โดยใช้วิธี hairy root ให้ประสิทธิภาพในการถ่ายยีนสูง (31.25 เปอร์เซ็นต์) การศึกษานี้พบว่า อายุเมล็ด พันธุ์ สภาพแวดล้อมในการเลี้ยง-ร่วม และสภาพแวดล้อมที่วางเลี้ยง เป็นปัจจัยที่สำคัญที่มีผลต่อประสิทธิภาพการถ่ายยีน

Abstract: Plasmid pCAMBIA 1301-choA was transformed intoAgrobacterium rhizogenes strain K599 and A. tumefaciens strain EHA 105 for mungbean transformation. Cotyledons from different ages of mungbean seedlings were inoculated with both bacteria. The two-day-old cotyledons that were co-cultured with hairy root bacteria showed higher ability toproduce branched roots than the others. An average of 10 branched roots was formed on both the wounded abaxial site and the hypocotyl cut end. Ten of 75 individual lines (13.25%) showed GUS positive. In addition,cotyledons that were cut and cultured on MB medium supplemented with 2mgml-1 BAP for 4 days before co-culture with A. tumefaciens using hairy root method revealed high transformation ability (31.25%). It was found that seed age, cultivar, co-culture conditions and culture conditions were important factors affecting the transformation efficiency.

มหาวิทยาลัยวลัยลักษณ์

Address: นครศรีธรรมราช (Nakhon Si Thammarat)

Email: clm@wu.ac.th

Name: Thailand Research Fund.

Role: Fund

Issued: 2548-12-08

Modified: 2548-12-08

บทความ/Article

tha

©copyrights มหาวิทยาลัยวลัยลักษณ์

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	SAT00014.pdf	216.44 KB	82	2020-03-16 18:01:44

ใช้เวลา

0.022082 วินาที