Abstract:
การทดลองชักนำชิ้นส่วนปลายยอดขนาด 3.0 5.0 มม. ของกล้วยไม้สกุล Phalaenopsis ลูกผสม ให้เกิด Protocorm-like bodies (PLBs) โดยเพาะเลี้ยงต้นแม่พันธุ์ซึ่งอยู่ในสภาพปลอดเชื้อ ภายใต้แสงจากหลอด LEDs สีแดง, สีน้ำเงิน, สีขาว, จากหลอดฟลูออเรสเซนต์ชนิด daylight และ สภาพไม่มีแสง แล้วนำชิ้นส่วนปลายยอดไปเพาะเลี้ยงบนอาหารกึ่งแข็งสูตร Vacin and Went (VW) ซึ่งเติม BA เข้มข้น 0, 1, 2, 3, 4 และ 5 มก./ล.; (NH4)2SO4 เข้มข้น 750 มก./ล., KNO3เข้มข้น 840 มก./ล., ½ VW, VW และ สูตร WS; น้ำตาลทรายขาวปริมาณ 0, 10, 20 หรือ 30 ก./ล.; น้ำมะพร้าวอ่อนเนื้อสองชั้น 150, 200, 250, 350 และ 500 มล./ล. ใช้ชิ้นส่วนปลายยอดขนาด 2.0 3.0 มม. และ 3.0 5.0 มม. นำมาเพาะเลี้ยงบนอาหารกึ่งแข็งสูตร VW ร่วมกับ น้ำมะพร้าว 500 มล./ล, (NH4)2SO4 เข้มข้น 750 มก./ล, น้ำตาลทรายขาว 20 ก./ล. หลังจากแช่ชิ้นส่วนปลายยอดในสารละลาย BA เข้มข้น 5 มล./ล เป็นเวลา 0, 5, 10, 15 และ 20 นาที ก่อนเพาะเลี้ยงภายใต้แสงฟลูออเรสเซนต์ ชนิด Daylight ความเข้มแสง 40 mol m-2s-1 อุณหภูมิที่ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 สัปดาห์พบว่าแสงชนิดต่างๆที่ต้นแม่พันธุ์ได้รับนาน 4 สัปดาห์และที่ขวดเพาะเลี้ยงได้รับนาน 8 สัปดาห์ มีอิทธิพลต่อการเกิด PLBs ไม่แตกต่างกันขณะที่ BA 4 และ 5 มิลลิกรัมต่อลิตร ส่งผลให้ได้จำนวนชิ้นปลายยอดที่เกิด PLBs และจำนวน PLBs ต่อชิ้นปลายยอดมากที่สุดไม่แตกต่างกัน ในขณะที่สูตร VW, VW ที่เติม(NH4)2SO4 750 มิลลิกรัมต่อลิตร และ VW ที่เติม KNO3 840 มิลลิกรัมต่อลิตร ทำให้ได้จำนวนชิ้นปลายยอดที่เกิด PLBs และจำนวน PLBs ต่อชิ้นปลายยอดมากที่สุด ไม่แตกต่างกัน สูตรอาหารที่มีน้ำตาลทรายขาวปริมาณ 0 30 กรัมต่อลิตร ร่วมกับน้ำมะพร้าวอ่อน 150 มิลลิลิตรต่อลิตร ทำให้ได้จำนวนชิ้นปลายยอดที่เกิด PLBs และจำนวน PLBs ต่อชิ้นปลายยอดไม่แตกต่างกัน ในขณะที่สูตรซึ่งมีน้ำมะพร้าว 350 และ 500 มิลลิลิตรต่อลิตร ทำให้ได้จำนวนชิ้นส่วนปลายยอดที่เกิด PLBs และจำนวน PLBs ต่อชิ้นปลายยอดมากที่สุดไม่แตกต่างกัน นอกจากนี้ยังพบว่า การแช่ชิ้นส่วนปลายยอดทั้งสองขนาด เป็นเวลา 10 20 นาที ส่งผลให้จำนวนชิ้นปลายยอดที่เกิด PLBs และจำนวน PLBs ต่อชิ้นปลายยอดไม่แตกต่างกัน
Experiments were performed to induced the protocorm-like bodies (PLBs) from 3.0 5.0 mm tallshoot tips of Phalaenopsis hybrid. The mother plants were aseptically cultured under 40 μmol m-2s-1 light from red, blue or white LEDs, daylight fluorescence tubes or dark condition. Then shoot-tips were cultured in culture vessel containing modified Vacin and Went (VW) agar media with0, 1, 2, 3, 4, or 5 mg/l BA; 750 mg/l (NH4)2SO4, or 840 mg/l KNO3, half or fullstrength VW or WS salt; 0, 10, 20 or 30 g/l table sugar; 150, 200, 250, 350 or 500 ml/l young-coconut water. Moreover, 2.0 3.0 mm or 3.0 5.0 mm tall shoot-tips were cultured in VW media containing 500 ml/l young-coconut water, 750 mg/l (NH4)2SO4, 20 g/l table sugar after dipped in 5 ml/l BA for 0, 5, 10, 15 and 20 minutes. All of the cultures were cultured under 40 μmol m-2s-1 light from daylight fluorescence tubes, at 25° C. for 8 weeks. After 8 weeks of cultured, it was found that there was no significant difference between the mother plants and cultures of explant that were under the different types of light for 4 weeks on the PLB forming explants and the number of PLBs per explant. There was also no significant difference between the explant cultured on modified VW media with 4 and 5 mg/l BA which gave the highest number of PLBs-forming explants and the number of PLBs per explant. In addition, there was no significant difference between the explants cultured on VW, VW with 750 mg/l (NH4)2SO4and VW with 840 mg/l KNO3 on the number of PLBs-forming explants and the number of PLBs per explant. The media contained 0 30 g/l table sugar and 150 m/l young-coconut water yielded no significant difference on the PLBs forming explants and the number of PLBs per explant. There was no significant effect of the media containing 350 and 500 ml/l young-coconut water on the highest number of PLBs forming explants, and the number of PLBs per explant. Meanwhile, dipping the shoot tip in 5 mg/l BA for 10 20 minutes had no significant effect on the number of PLBs-forming explants, and the number of PLBs per explant